Часті запитання
Так, використання дублікатів стандартів і зразків дозволяє контролювати точність аналізу і підвищує достовірність отриманих результатів.
Зразки містять концентрацію аналіту, що перевищує значення найбільшого калібратора. Розведіть зразок і повторіть тестування.
Для досліджень ІФА лабораторія повинна самостійно встановити референтний інтервал або верифікувати інтервал, наданий в інструкції до тесту. Детальні настанови щодо таких дій можна знайти в документі CLSI EP28.
Контамінація реагентів, забруднений субстрат, висока температура в лабораторії, використання низької якості води для промивного розчину, неправильна процедура промивання, мікробне забруднення промивача, неправильний промивний розчин, несправність зчитувача мікропланшетів.
Можливі причини: надто тривалий час інкубації, висока температура в лабораторії, недостатнє промивання, використання неправильного кон’югату, несправність зчитувача мікропланшетів.
Можливі причини: відсутність ключового реагенту, неправильне розведення реагентів або зразків, недотримання об’єму реагентів, недостатній час інкубації, низька температура в лабораторії, неправильні умови зберігання, зіпсуті реагенти, неправильно приготовлений промивний розчин, мікробне забруднення промивача, надмірне промивання, змішування партій реагентів, некаліброване обладнання, зчитування на неправильній довжині хвилі, або повторне використання герметика для мікропланшетів.
Причини: неоднаковий час інкубації між планшетами, нерівномірне промивання, несправність приладу для дозування, зразки не доведені до кімнатної температури, використання реагентів з різних партій.
Занадто багато часу на додавання зразків або реагентів, несправність багатоканального дозатора, нерівномірне промивання або несправність промивача, поганий розподіл антитіл у зразку.
Це може свідчити про контамінацію субстрату (або суміші субстратів), тому його не можна використовувати.
Використовуйте тільки ті значення, які знаходяться в межах діапазону виявлення набору. Значення за межами стандартної кривої можуть бути нелінійними. Зразки з високими значеннями потрібно розвести і повторити тестування.
Надмірна кількість аналіту перекриває зв’язувальну здатність антитіл, що призводить до низького сигналу та хибно низьких результатів при високій концентрації аналіту. Інформацію про граничну концентрацію для хук-ефекту можна знайти в інструкції до набору.
Зразки можуть потребувати розведення для попадання в функціональний діапазон аналізу. Наш буфер для розведення зразків зменшує фоновий шум та мінімізує неспецифічні взаємодії, оптимізуючи сигнал аналізу.
Більшість біологічних зразків отриманих із сироватки, плазми або рідини клітинної культури містять складну суміш різних білків і солей. Присутність цих компонентів може знизити здатність антитіл до зв’язування з антигеном або викликати помилковий сигнал через неспецифічні взаємодії. Це призводить до хибних результатів та збільшує час встановлення рівноваги.
Можливі причини: зразок не містить аналіту, матричний ефект маскує виявлення, або розведення зразка було неправильним. Перевірте дотримання інструкцій щодо розведення.
Загальні рекомендації такі. Ви можете довіряти результатам вашого ІФА, якщо оптична щільність лунки холостої проби (бланку) ≤ 0.1
ОЩ максимального значення стандарту ≥ 1.2, оптична щільність зразків має вписуватись в межі значень стандартів, значення контролів мають відповідати паспортним даним
Конкретні рекомендації щодо контролю якості прописані в кожній інструкції.
Більшість основних компонентів аналізаторів Maglumi закуповуються у провідних світових виробників. Наприклад, ФЕП – від провідного виробника (Hamamatsu Photonics) в Японії. Якість гарантована. Аналізатори ІХЛА Maglumi пройшли сертифікацію системи ISO та CE, отримали низку авторитетних сертифікатів, а Maglumi Х3 пройшов сертифікацію FDA. Такі авторитетні документи є гарантією якості.
Продуктивність аналізаторів Maglumi постійно вдосконалюється, щоб задовольнити різні потреби клієнтів. Крім того, виробник запустив систему моніторингу стану аналізатора Snibelinker real-time analyzer status monitoring для досягнення моніторингу кінцевих користувачів в режимі реального часу протягом 24 годин.
Практика показує, що аналізатори не зупинялися через проблеми з якістю, а всі несправності можна вирішити шляхом заміни запасних частин.
Багато літературних джерел підтверджують, що ІФА є дешевим і поширеним методом, але вимагає ручної постановки, має високі вимоги до контролю температури, нестабільні результати, а швидкість, точність і чутливість тесту не такі високі, як у методу ІХЛА. Аналізатори Snibe Maglumi – це повністю автоматизована робота, без потреби в додатковому залученні оператора, а також високошвидкісне тестування, безперервне завантаження зразків і реагентів, одночасне проведення декількох аналізів, наявність аварійного режиму тощо. Snibe має найбільше меню реагентів у світі, включаючи спеціальні та унікальні реагенти, яких немає в жодного іншого виробника, безкоштовні калібратори та контроль якості, які вже включені в набір. У багатьох країнах технологія ІХЛА швидко витісняє ІФА, і ця тенденція очевидна.
Всі реагенти розробляються із суворою системою внутрішнього аудиту, щоб забезпечити якість і відповідність клінічним стандартам. Деякі з реагентів Snibe отримали патенти США, наприклад, 25-OH Вітамін D. Крім того, система управління якістю Snibe пройшла сертифікацію за міжнародним стандартом ISO, а реагенти Snibe можуть брати участь у відомих системах зовнішньої оцінки якості (EQA), включаючи Randox (Великобританія) RIQAS, Biorad (США) EQAS, CAP Proficiency Testing тощо.
Всі реагенти мають відмінні характеристики та гарантовану якість. Компанія Snibe щороку успішно проходить аудит сертифікації системи якості ISO та сертифікацію CE. Snibe створила спеціальний відділ якості, включаючи відділ забезпечення якості (QA) та відділ контролю якості (QC), щоб гарантувати, що кожен проданий аналізатор та реагент знаходиться у високоякісному стані, а також будуть проведені процедури перевірки перед поставкою. Snibe представляє передову лінію з виробництва хемілюмінесцентних реагентів, яка відповідає рівню виробництва Roche, Abbott та інших виробників першої лінії.
Snibe – це технологічне підприємство з потужним науково-дослідницьким центром. Центр досліджень і розробок налічує понад 600 основних співробітників, а вдосконалення та оптимізація продуктивності реагентів відбувається дуже швидко. Порівняно з чотирма основними виробниками ІХЛА у світі, ефективність вдосконалення реагентів набагато вища, що гарантує оптимальну продуктивність кожного аналізу.
Початковий намір використання голки полягає в тому, щоб зменшити витрати користувачів, а голка Snibe Maglumi використовує спеціальну технологію внутрішнього полірування, має зовнішнє тефлонове покриття, після додавання зразка внутрішні і зовнішні стінки очищаються, що дозволяє ефективно уникнути перехресного забруднення. Результати були перевірені експериментально і повністю відповідають вимогам клінічних випробувань.
Аналізатор MAGLUMI X3 використовує новітню технологію X-Tech. Завдяки оптимізації структурної схеми і використанню поліпшених механізмів додавання, очищення і вимірювання зразків, швидкість тестування підвищується при одночасному зменшенні розміру приладу. Це відповідає потребам кінцевих клієнтів зменшити площу приладу і отримати вищу швидкість тестування.
Зазвичай загальний термін придатності набору становить один рік та 28 днів після відкриття. Але для реагентів другого покоління термін придатності деяких аналізів збільшено до 18 місяців та 24 місяців на основі дослідження стабільності реагентів, наприклад, нові тести на АФП, ПСА, вільний ПСА мають термін придатності 24 місяці.
Прилад слід експлуатувати в суворій відповідності до СОП, а перекалібрування виконувати відповідно до вимог інструкцій з використання: залежно від набору це може бути щотижня, кожні два тижні та кожні чотири тижні. Наприклад, для ТТГ, вільного T4 – кожні 4 тижні, анти-ТТГ – щотижня. Через різну сировину та виробничі процеси стабільність калібрування та цикл калібрування відрізняються для різних реагентів. Для порівняння, анти-ТТГ від Roche вимагає калібрування один раз на день.
У стандартному режимі для контролю якості одного рівня потрібен один тест, для контролю якості двох рівнів – 2 тести. Реагенти MAGLUMI використовують 10-точкову еталонну криву і 2-точкове калібрування. Для калібрування потрібно 4 тести (2 тести для високого калібрування і 2 тести для низького калібрування).
Через велику кількість білка в плазмі, який може заважати проведенню деяких аналізів. Для вирішення цієї проблеми потрібно просто суворо дотримуватися вимог щодо типу зразка, зазначених в інструкції з використання. Для реагентів другого покоління в інструкції з використання додано також плазму.
Під час виготовлення набору, об’єм реагенту, який заливають у флакон, розраховується на 110 тестів. Причин, чому реагенту вистачає менш ніж на 100 тестів, може бути кілька: летючість реагентів, неправильне зберігання набору, а також постійне струшування і перемішування набору в зоні реагенту протягом дуже довгого часу, що значно прискорює швидкість його випаровування. Тому ми рекомендуємо кінцевому користувачеві запечатувати набір і поміщати його в холодильник після використання.
Орієнтовно результат зразка вважається достовірним, якщо внутрішній контроль ампліфікується в межах Ct 20–40. Якщо внутрішній контроль не ампліфікується або Ct перевищує 40, результат недійсний. Точні критерії для конкретного набору слід перевіряти в його інструкції.
Перевірте, чи відповідають значення Ct калібраторів очікуваним. Додатково оцініть якість виконання за показниками нахилу стандартної кривої та ефективності ампліфікації. Оптимальний нахил має становити близько –3,32, що відповідає ефективності близько 100 %. Допустимими вважаються значення нахилу в межах від –3,1 до –3,6 та ефективність від 90 % до 110 %, якщо виробник не вказав інші норми.
Негативний контроль для виключення контамінації, позитивний контроль для перевірки працездатності реакції, екзогенний внутрішній контроль для визначення ефективності екстракції та ампліфікації, і стандарти для кількісної ПЛР.
До найпоширеніших інгібіторів ПЛР належать фенол, сечовина, гепарин, гумінові кислоти, гемоглобін та нуклеази. Ці речовини можуть потрапити до зразка з початкового матеріалу, в результаті підготовки/екстракції, або ж через контаміновані витратні матеріали.
Насамперед перевірте правильність розташування лінії порогу. Вона має проходити вище фону, у зоні експоненціального зростання сигналу. Якщо виробник надав рекомендоване положення порогового значення, обов’язково використовуйте ці налаштування для коректного аналізу. Також звертайте увагу на форму кривих ампліфікації, стабільність Ct значень для калібраторів і стандартів та наявність ампліфікації внутрішнього контролю у відповідних зразках.
Практично всі наші набори валідовані для роботи з ABI 7500, Biorad CFX96 та Qiagen Rotor-Gene. Перелік може бути розширений залежно від набору.
Ми пропонуємо ПЛР-набори для кількісного визначення вірусних гепатитів B, C і D, герпесвірусів, цитомегаловірусу, вірусу Епштейна-Барр, а також вірусів BK та JC. У нашому асортименті представлені рішення від Dia.Pro (Італія), Roboscreen (Німеччина) та Labua (Україна).
Тривалість автоматичної екстракції залежить від обраної програми. Найкоротший доступний час виділення ДНК з використанням набору Snibe складає 11 хвилин.
Snibe Molecision MP32/96 підтримує екстракцію нуклеїнових кислот із плазми, сироватки, цільної крові, розчинів консервації мазків (орофарінгеальних і назофарінгеальних), культивованих клітин та заморожених тканин.
Ми пропонуємо ручний метод екстракції нуклеїнових кислот на спін-колонках (LUA-PCR.EXTR.50) та автоматизовану екстракцію за допомогою магнітних мікрочасточок на Snibe Molecision MP-32 та Snibe Molecision MP-96.
Так, ми можемо надіслати вам інструкцію на набір, який вас зацікавив.
Ми пропонуємо широкий асортимент продукції, в тому числі набори ІФА, первинні та вторинні антитіла, моноклональні антитіла, пептиди, рекомбінантні протеїни, тощо.
Перевагу слід надавати свіжим зразкам. Однак більшість зразків можна зберігати до трьох місяців при температурі -20°C або довше при -80°C. Важливо, щоб зразки не були гемолізованими або деградованими, а також не зазнали численних циклів заморожування-розморожування.
Наш великий каталог включає набори для ІФА, які можна використовувати для вивчення різних біохімічних шляхів і станів, таких як рак, сигнальний шлях інсуліну і окислювальний стрес. Ми пропонуємо тисячі наборів ІФА, які взаємодіють зі зразками людини, миші, щура, великої рогатої худоби, кролика, курки, свині, мавпи, кози, вівці, собаки, морської свинки. У нас також є багато інших наборів для ІФА, які можна використовувати зі зразками менш поширених видів тварин, таких як кінь, риба, кішка, хом’як, осел, качка, голуб, верблюд, гусак, рослина тощо. Більшість наших наборів для ІФА можна використовувати з широким спектром типів зразків, включаючи сироватку, плазму і гомогенати тканин, а також лізати і супернатанти клітинних культур.
Термін придатності коливається залежно від набору, проте становить не менше 6 місяців.
Всі реагенти для наукових досліджень виготовляються під замовлення, тому час очікування такої продукції становить 2-2,5 місяців, з яких 4-6 тижнів займає виготовлення реагентів.
Залиште запит і ми підберемо вам реагенти. Зазвичай ми пропонуємо декілька варіантів наборів з різною чутливістю, в різному фасуванні. Проте ви можете одразу уточнити ці параметри під час формування запиту.
Вся інформація про типи зразків, які можуть бути протестовані за допомогою вашого тесту, а також процедура забору детально описана в інструкції з використання.
Виберіть чисту поверхню для збору зразка. Ретельно вимийте руки з милом і сполосніть теплою водою.
Залежно від типу тесту, в інструкції з використання буде детально вказано час, який потрібно почекати, перш ніж прочитати результат. Не рекомендується інтерпретувати результат до чи після зазначеного часу.
Якщо в контрольній області не з’являється жодної лінії, тест вважається недійсний, навіть якщо на тестовій ділянці є лінія. Найбільш ймовірними причинами є недостатній об’єм зразка або неправильна методика.
Ні, вам не потрібне додаткове обладнання для проведення тестування.
Дозатори Microlit калібровані за стандартом ISO 8655 у сертифікованій ISO 17025 лабораторії, і сертифікат про калібрування входить у комплект поставки.
Дозатори Microlit можна повністю автоклавувати при 121°C і 15 psi протягом щонайменше 20 хвилин без додаткової підготовки.
Дозатори Microlit мають універсальний конус для наконечників, що сумісний з більшістю стандартних наконечників. Проте при виборі наконечників зверніть увагу на ємність. Наприклад, розміри наконечників для дозаторів до 10 мкл, до 200 мкл, до 1000 мкл, до 5000 мкл і до 10000 мкл відрізнятимуться.
Дозатори Microlit представлені в об’ємах від 0,2 мкл до 10 мл і доступні у 15 моделях з фіксованим об’ємом та 9 моделях зі змінним об’ємом.
Діамеб трейд – ексклюзивний дистриб’ютор дозаторів Microlit.
Microlit — індійська компанія, що спеціалізується на розробці та виробництві високоточних інструментів для роботи з рідинами, таких як диспенсери для пляшок, електронні бюретки, дозатори, мініатюрні мікропіпетки та електронні інструменти для заповнення піпеток. З 1991 року компанія впроваджує інновації з високою точністю і має мережу споживачів у 65 країнах, здобуваючи визнання в галузі охорони здоров’я та наук про життя. Детальніше про компанію та її продукцію можна дізнатися на офіційному сайті Microlit.
Пряме піпетування використовується для водних розчинів. Натисніть кнопку до першої точки натискання, повільно відпустіть, щоб набрати рідину, і натисніть до другої точки для вивільнення рідини. Зворотне піпетування підходить для рідин з високим тиском пари, високою в’язкістю і схильністю до піноутворення. Крім того, цей процес ідеально підходить для дозування малих об’ємів.
Натисніть кнопку до другої точки, повільно відпустіть, щоб набрати рідину, і натисніть до першої точки для вивільнення частини рідини. При цьому частина рідини залишиться в наконечнику.
Перевірте, чи наконечник належним чином прилягає до конуса. Натисніть сильніше (але не надто сильно). Використовуйте відповідний наконечник. Якщо проблема зберігається, перевірте і замініть зношене О-подібне кільце.
Якщо між наконечником і конусом дозатора потрапили сторонні частинки, очистіть конус дозатора безворсовою серветкою, використовуйте новий наконечник.
Можливо, ваш дозатор потребує калібрування або ви використовуєте неправильну техніку піпетування. Зверніться до посібника з експлуатації для вирішення цієї проблеми.
Частота калібрування залежить від кількох факторів, включаючи частоту використання, властивості рідин, які піпетуються, та максимальні допустимі відхилення, встановлені користувачем. Відповідно до стандарту ISO 8655 для піпеток рекомендується проводити зовнішнє калібрування щонайменше раз на рік. Водночас верифікацію точності і внутрішнє калібрування дозаторів радимо проводити раз на три місяці.
Точність механічної піпетки має важливе значення для якості результатів. Регулярне калібрування забезпечує довготривалу точність і повторюваність вимірювань піпеткою.
Механічні дозатори зазвичай працюють за принципом повітряної подушки. Повітряна подушка відокремлює зразок у наконечнику піпетки від поршня. Натискання кнопки дозування змушує поршень рухатися вниз, виштовхуючи повітря, і створюючи вакуум, що всмоктує рідину в наконечник. Відпускання кнопки заповнює наконечник рідиною. Повторне натискання кнопки знову змушує поршень рухатися вниз, виштовхуючи повітря і дозуючи рідину.