Так, використання дублікатів стандартів і зразків дозволяє контролювати точність аналізу і підвищує достовірність отриманих результатів.
Зразки містять концентрацію аналіту, що перевищує значення найбільшого калібратора. Розведіть зразок і повторіть тестування.
Для досліджень ІФА лабораторія повинна самостійно встановити референтний інтервал або верифікувати інтервал, наданий в інструкції до тесту. Детальні настанови щодо таких дій можна знайти в документі CLSI EP28.
Контамінація реагентів, забруднений субстрат, висока температура в лабораторії, використання низької якості води для промивного розчину, неправильна процедура промивання, мікробне забруднення вошера, неправильний промивний розчин, несправність зчитувача мікропланшетів.
Можливі причини: надто тривалий час інкубації, висока температура в лабораторії, недостатнє промивання, використання неправильного кон’югату, несправність зчитувача мікропланшетів.
Можливі причини: відсутність ключового реагенту, неправильне розведення реагентів або зразків, недотримання об’єму реагентів, недостатній час інкубації, низька температура в лабораторії, неправильні умови зберігання, зіпсуті реагенти, неправильно приготовлений промивний розчин, мікробне забруднення вошера, надмірне промивання, змішування партій реагентів, некаліброване обладнання, зчитування на неправильній довжині хвилі, або повторне використання герметика для мікропланшетів.
Причини: неоднаковий час інкубації між планшетами, непослідовне промивання, несправність приладу для дозування, зразки не доведені до кімнатної температури, використання реагентів з різних партій.
Занадто багато часу на додавання зразків або реагентів, несправність багатоканального дозатора, непослідовне промивання або несправність вошера, поганий розподіл антитіл у зразку.
Це може свідчити про контамінацію субстрату (або суміші субстратів), тому його не можна використовувати.
Орієнтовно результат зразка вважається достовірним, якщо внутрішній контроль ампліфікується в межах Ct 20–40. Якщо внутрішній контроль не ампліфікується або Ct перевищує 40, результат недійсний. Точні критерії для конкретного набору слід перевіряти в його інструкції.
Перевірте, чи відповідають значення Ct калібраторів очікуваним. Додатково оцініть якість виконання за показниками нахилу стандартної кривої та ефективності ампліфікації. Оптимальний нахил має становити близько –3,32, що відповідає ефективності близько 100 %. Допустимими вважаються значення нахилу в межах від –3,1 до –3,6 та ефективність від 90 % до 110 %, якщо виробник не вказав інші норми.
Негативний контроль для виключення контамінації, позитивний контроль для перевірки працездатності реакції, екзогенний внутрішній контроль для визначення ефективності екстракції та ампліфікації, і стандарти для кількісної ПЛР.
До найпоширеніших інгібіторів ПЛР належать фенол, сечовина, гепарин, гумінові кислоти, гемоглобін та нуклеази. Ці речовини можуть потрапити до зразка з початкового матеріалу, в результаті підготовки/екстракції, або ж через контаміновані розхідні матеріали.
Насамперед перевірте правильність розташування лінії порогу. Вона має проходити вище фону, у зоні експоненціального зростання сигналу. Якщо виробник надав рекомендовану позицію трешхолду, обов’язково використовуйте ці налаштування для коректного аналізу. Також звертайте увагу на форму кривих ампліфікації, стабільність Ct значень для калібраторів і стандартів та наявність ампліфікації внутрішнього контролю у відповідних зразках.
Практично всі наші набори валідовані для роботи з ABI 7500, Biorad CFX96 та Qiagen Rotor-Gene. Перелік може бути розширений в залежності від набору.
Ми пропонуємо ПЛР-набори для кількісного визначення вірусних гепатитів B, C і D, герпесвірусів, цитомегаловірусу, вірусу Епштейна-Барр, а також вірусів BK та JC. У нашому асортименті представлені рішення від Dia.Pro (Італія), Roboscreen (Німеччина) та Labua (Україна).
Тривалість автоматичної екстракції залежить від обраної програми. Найкоротший доступний час виділення ДНК з використанням набору Snibe складає 11 хвилин.
Snibe Molecision MP32/96 підтримує екстракцію нуклеїнових кислот із плазми, сироватки, цільної крові, розчинів консервації мазків (орофарінгеальних і назофарінгеальних), культивованих клітин та заморожених тканин.
Так, ми можемо надіслати вам інструкцію на зацікавивший вас набір.
Які реагенти для наукових досліджень ви можете запропонувати? Ми пропонуємо широкий асортимент продукції, в тому числі набори ІФА, первинні та вторинні антитіла, моноклональні антитіла, пептиди, рекомбінантні протеїни, тощо.
Перевагу слід надавати свіжим зразкам. Однак більшість зразків можна зберігати до трьох місяців при температурі -20°C або довше при -80°C. Важливо, щоб зразки не були гемолізованими або деградованими, а також не зазнали численних циклів заморожування-розморожування.
Наш великий каталог включає набори для ІФА, які можна використовувати для вивчення різних біохімічних шляхів і станів, таких як рак, сигнальний шлях інсуліну і окислювальний стрес. MyBioSource продає тисячі наборів ІФА, які взаємодіють зі зразками людини, миші, щура, великої рогатої худоби, кролика, курки, свині, мавпи, кози, вівці, собаки, морської свинки. У нас також є багато інших наборів для ІФА, які можна використовувати зі зразками менш поширених видів тварин, таких як кінь, риба, кішка, хом’як, осел, качка, голуб, верблюд, гусак, рослина тощо…. Більшість наших наборів для ІФА можна використовувати з широким спектром типів зразків, включаючи сироватку, плазму і гомогенати тканин, а також лізати і супернатанти клітинних культур.
Термін придатності коливається в залежності від набору, проте становить не менше 6 місяців.
Всі реагенти для наукових досліджень виготовляються під замовлення, тому час очікування такої продукції становить 2-2,5 місяців, з яких 4-6 тижнів займає виготовлення реагентів.
Залиште запит і ми підберемо вам реагенти. Зазвичай ми пропонуємо декілька варіантів наборів з різною чутливістю, в різному фасуванні. Проте ви можете одразу уточнити ці параметри під час формування запиту.
Дозатори Microlit калібровані за стандартом ISO 8655 у сертифікованій ISO 17025 лабораторії, і сертифікат про калібрування входить у комплект поставки.
Дозатори Microlit можна повністю автоклавувати при 121°C і 15 psi протягом щонайменше 20 хвилин без додаткової підготовки.
Дозатори Мікроліт мають універсальний конус для наконечників, що сумісний з більшістю стандартних наконечників. Проте при виборі наконечників зверніть увагу на ємність. Наприклад, розміри наконечників для дозаторів до 10 мкл, до 200 мкл, до 1000 мкл, до 5000 мкл і до 10000 мкл відрізнятимуться.
Дозатори Microlit представлені в об’ємах від 0,2 мкл до 10 мл і доступні у 15 моделях з фіксованим об’ємом та 9 моделях зі змінним об’ємом.
Діамеб трейд – ексклюзивний дистрибьютор дозаторів Microlit.
Мікроліт – індійська компанія, що спеціалізується на розробці та виробництві високоточних інструментів для роботи з рідинами, таких як диспенсери для пляшок, електронні бюретки, дозатори, мініатюрні мікропіпетки та електронні інструменти для заповнення піпеток. З 1991 року компанія впроваджує інновації з високою точністю і має мережу споживачів у 65 країнах, здобуваючи визнання в галузі охорони здоров’я та наук про життя. Детальніше про компанію та її продукцію можна дізнатися на офіційному сайті Microlit.
Пряме піпетування використовується для водних розчинів. Натисніть кнопку до першої точки натискання, повільно відпустіть, щоб набрати рідину, і натисніть до другої точки для вивільнення рідини. Зворотне піпетування підходить для рідин з високим тиском пари, високою в’язкістю і схильністю до піноутворення. Крім того, цей процес ідеально підходить для дозування малих об’ємів.
Натисніть кнопку до другої точки, повільно відпустіть, щоб набрати рідину, і натисніть до першої точки для вивільнення частини рідини. При цьому частина рідини залишиться в наконечнику.
Перевірте, чи наконечник належним чином прилягає до конуса. Натисніть сильніше (але не надто сильно). Використовуйте відповідний наконечник. Якщо проблема зберігається, перевірте і замініть зношене О-подібне кільце.
Якщо між наконечником і між конусом наконечника потрапили сторонні частинки, очистіть конус дозатора безворсовою тканиною, використовуйте новий наконечник.
Можливо, ваш дозатор потребує калібрування або ви використовуєте неправильну техніку піпетування. Зверніться до посібника з експлуатації для вирішення цієї проблеми.
Частота калібрування залежить від кількох факторів, включаючи частоту використання, властивості рідин, які піпетуються, та максимальні допустимі відхилення, встановлені користувачем. Відповідно до стандарту ISO 8655 для піпеток рекомендується проводити зовнішнє калібрування щонайменше раз на рік. Водночас верифікацію точності і внутрішнє калібрування дозаторів радимо проводити раз на три місяці.