Надмірна кількість аналіту перекриває зв’язуючу здатність антитіл, що призводить до низького сигналу та хибно низьких результатів при високій концентрації аналіту. Інформацію про граничну концентрацію для хук-ефекту можна знайти в інструкції до набору.